Иммуноферментный анализ входит в группу иммунохимических методов и относится к наиболее популярным методам лабораторной диагностики, применяется при определении инфекционных, воспалительных, эндокринных, онкологических, аллергических и иммунных заболеваний, задействуется в определении уровня онкомаркеров, гормонов, выявлении лекарственных препаратов и прочих соединений в биологических средах человека.

Принцип действия ИФА основан на специфическом взаимодействии между антигеном и антителом. Постановка реакций осуществляется с целью выявления антител или антигенов. Результаты выдаются качественно или количественно. При качественной диагностике выявляется наличие или отсутствие определенных антител или антигенов в биоматериале. При количественной диагностике возможно определить концентрацию вещества в биологической жидкости. Метод ИФА характеризуется высокой специфичностью и чувствительностью, возможностью определить заболевание и отследить динамику процесса, доступностью.

Сфера применения иммуноферментного анализа:

1) выявление специфических антител к инфекционным заболеваниям;

2) выявление антигенов инфекционных и венерологических заболеваний;

3) исследование гормонального статуса;

4) обследование на онкомаркеры;

5) обследование по поводу наличия аутоиммунных заболеваний.

Ультразвуковое исследование действует на основе отражения ультразвуковых волн от внутренних органов. Данное исследование позволяет создать изображение внутренних органов на мониторе. Различные по плотности среды (жидкость, газ, кость) различным образом отображаются на экране. Посредством узи возможно определить размер и форму внутренних органов и заметить структурные изменения. Эхокардиография (ЭхоКГ) представляет собой вариант УЗИ, применяемый для исследования сердца.

Эндоскопическое исследование представляет собой исследование полостей и полых органов с помощью эндоскопа – гибкого волоконно-оптического инструмента с диаметром трубки 0,8–1,5 см и длиной 0,3–1,5 м. С помощью эндоскопа можно получить качественное изображение бронхов, пищеварительного тракта и др. Современные эндоскопы могут быть оборудованы устройством забора образцов тканей для дальнейших лабораторных исследований, а также электрическим зондом для разрушения патологической ткани.

Компьютерная томография относится к рентгенологическим методам исследования. Характеризуется высокой точностью и разрешающей способностью. При проведении данного исследования делается серия рентгеновских снимков по требуемым параметрам (плоскость, толщина среза и др.).

Магнитно-резонансная томография представляет собой метод исследования, основанный на принципе действия мощного магнитного поля для получения точных изображений органов. Данный метод диагностики относится к высокоточным, но сложным и достаточно дорогим.

Радионуклеидное исследование основано на принципе распознавания радиоактивно меченых веществ, специфичных для того или иного органа. Индикатор (меченые вещества) в небольшом количестве вводят в вену пациента. Особенно популярен данный метод при исследовании кровоснабжения органов, в частности, злокачественных опухолей. Излучение индикаторов, распределившихся по организму, регистрируется гамма-камерой. Изображение воспроизводится на экране и фиксируется. Возможно генерирование трехмерного изображения, в частности, «холодных» или «горячих» узлов в щитовидной железе. Обычно исследование данного вида используется при дифференциальной диагностике.

ПЦР-диагностика представляет собой высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики. Принцип действия основан на выявлении в исследуемой пробе специфического участка ДНК или РНК возбудителя. Благодаря высокой чувствительности данный метод дает возможность выявить даже единичные клетки возбудителей (вирусов, бактерий). Для сравнения, чувствительность микроскопических и иммунологических тестов составляет 103–105 клеток в исследуемой пробе, чувствительность ПРЦ-теста – 10–1000 клеток. Одна биологическая проба дает возможность обнаружения нескольких возбудителей. Еще одно преимущество данного вида диагностики – возможность доклинической и ретроспективной диагностики. Возможно также исследование архивного материала или биологических остатков, что применяется при идентификации личности или установлении отцовства.

В качестве биологической пробы могут выступать всевозможные биологические среды и жидкости пациента: слюна, моча, кровь, соскобы эпителиальных клеток, ткани плаценты, выделения из половых органов и другие. При выявлении в пробе заданных условий (наличия возбудителя) определенный участок ДНК или РНК патогена подвергается амплификации (многократному удвоению) под действием ферментов в лабораторных условиях. После чего образуется достаточное количество ДНК или РНК для визуального анализа специалиста.

Эффективность ПРЦ-диагностики доказана в случае подозрения на следующие заболевания:

1) боррелиоз, клещевой энцефалит;

2) вирусные гепатиты А, В, С, G ( РНК-HAV, ДНК-HBV, РНК-HCV, РНК-HGV);

3) ВИЧ-инфекции (ВИЧ-1);

4) герпетическая инфекция (ДНК вируса простого герпеса ВПГ 1-го и 2-го типа);

5) инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр -ВЭБ);

6) ИППП (инфекции, передающиеся половым путем) – уреаплазмоз, гарднереллез, хламидиоз, микоплазмоз, трихомониаз);

7) кандидоз (грибы рода Candida);

8) коронавирусная инфекция COVID-19;

9) листериоз;

10) онкогенные вирусы (папилломавирусная инфекция);

11) туберкулез (микобактерия туберкулеза);

12) хеликобактерная инфекция (Helicobacter pylori);

13) цитомегаловирусная инфекция (ДНК-CMV) и пр.

Для получения точных результатов необходима правильная подготовка к сдаче биологического материала. Врачи рекомендуют не вступать в половые отношения за сутки до сдачи материала, кровь для исследования сдавать натощак утром, при сдачи мочи собирать первую утреннюю порцию в стерильный контейнер.

Изотермические амплификаторы. Полуавтоматические и автоматические. Применяются для амплификации цели (ДНК или РНК) в образце при постоянной температуре, путем применения реакций транскрипции и обратной транскрипции. Также используется для выявления усиленного продукта реакции путем применения олигонуклеотидных маркеров в режиме реального времени.

Амплификаторы нуклеиновых кислот термоциклические (термоциклеры). Полуавтоматические, автоматические, на ручном управлении. Применяются для амплификации мишеней ДНК или РНК в клиническом образце. Действие основано на применении термостабильного фермента полимеразы и повторяющихся циклов охлаждения и нагревания (термоциклирование) для репликации продукта. При получении амплифицированного продукта его идентифицируют посредством использования олигонуклеотидных маркеров в реальном времени или по конечной точке. Также данный анализатор обладает возможностью изоляции, экстрагирования, подготовки нуклеиновых кислот из клинического образца.

Анализаторы иммунологические жидкофазные. Полуавтоматические или автоматические. Применяются для качественного или количественного выявления химических и биологических маркеров в клиническом образце. Принцип работы основан на иммунологическом методе: при воздействии жидкофазного связывания иммунологические компоненты связываются без твердой фазы и определяются посредством флуоресцентного или хроматографического разделения.

Анализаторы иммунологические многоканальные. Полуавтоматические или автоматические. Применяются для качественного или количественного выявления множественных химических и биологических маркеров в клиническом образце. Принцип работы основан на сочетании двух и более технологий, включая хроматографическое или электрохимическое разделение в сочетании с ферментной, хемилюминесцентной, флуоресцентной, радиометрической, нефелометрической, электрометрической или фотометрической системой определения. Обычно для работы анализатора требуются определенные тестовые наборы для тех или иных аналитов или реагентов.

Анализаторы иммунологические нефелометрические. Полуавтоматические или автоматические. Принцип действия основан на применении иммунологического метода. Для определения скорости и количества агглютинации частиц через образование иммунных комплексов применяется нефелометрическая система детекции. Поддерживается обработка образца, данных и визуальное воспроизведение данных.

Анализаторы иммунологические с магнитными частицами. Полуавтоматические или автоматические. Принцип работы основан на иммунологическом методе. Применяется система детектирования с магнитными частицами. Антигены и антитела, меченные магнитными частицами, иммунологически связываются в твердой фазе (в частности, посредством иммунохроматографической тест-полоски, микропланшета).

Анализаторы иммуноферментные (ИФА). Полуавтоматические или автоматические. Принцип действия основан на применении иммунологического метода с использованием ферментов.

Анализаторы иммунофлуоресцентные. Полуавтоматические или автоматические. Могут быть стационарными или портативными. В результате иммунологической реакции между реагентом и образцом появляются флуоресцентные маркеры, которые и считываются прибором. В состав анализатора обычно входят автоматический отборник проб, дозатор реагентов, источник света, монохроматор или фильтр, флуоресцентная система обнаружения, программное обеспечение.

Анализаторы иммунохемилюминесцентные. Полуавтоматические или автоматические. Принцип работы основан на иммунологическом методе с применением системы хемилюминесцентного определения.

Анализаторы мультиплексные. Полуавтоматические или автоматические. Применяются для качественного или количественного одновременного определения множественных химических и биологических маркеров в клиническом образце. Принцип действия основан на иммунологическом методе: множество антител, расположенных на твердой поверхности или микрочастицах, объединяются. Обычно в состав прибора входит система определения связанного антигена-мишени (флуоресцентный, хемилюминесцентный, фотометрический, магнитный детектор).