Через 2–3 дня (иногда чуть позже) после спаривания матка начинает откладывать яйца. Прежде чем сделать это, матка осматривает ячейку – если она неправильной формы или недостаточно вычищена, матка яйцо в нее не откладывает, а переходит к осмотру следующих ячеек.
Чтобы отложить яйцо в подготовленную пчелами ячейку, матка, крепко цепляясь коготками лапок за стенки смежных ячеек, опускает в нее свое брюшко. В таком положении она остается 10–15 секунд, после чего быстро переходит к осмотру другой ячейки. Таким образом в течение 1 минуты откладывается 2–3 яйца. После 20–25 минут кладки матка минут 7 отдыхает, принимая пищу от пчел-кормилиц.
Оплодотворенные яйца матка откладывает по одному в пчелиные ячейки или в Маточные мисочки (из них выводятся исключительно женские особи – рабочие пчелы из пчелиных ячеек или матки из маточных мисочек), неоплодотворенные – в трутневые (из них соответственно выводятся только трутни).